熒光定量PCR技術簡介   

     我室自1996年開展了常規(guī)PCR技術，雖然具有很高的特異性和靈敏性，但仍有一些缺陷：①由于采用終點法檢測，無法實現(xiàn)定量檢測；②采用電泳法觀察結果，極易造成污染；③不易進行質控；④結果判斷有時會受非特異性擴增帶的干擾等等，傳統(tǒng)的實驗方法已遠遠不能滿足臨床的需要。
    近日我室引進國內最先進的熒光定量PCR檢測系統(tǒng)，它是國際上最新研制的一種核酸定量技術，該技術在PCR反應系統(tǒng)中引入了熒光標記探針，具有高靈敏性、高特異性、和高精確性的特點。目前已被應用于病原體測定、腫瘤基因檢測、免疫分析、基因表達、突變和多態(tài)性研究等多個領域。
    熒光定量PCR（簡稱FQ-PCR）由美國PE公司1995年研制成功，該技術是在常規(guī) PCR基礎上加入熒光標記探針來實現(xiàn)其定量功能的，與普通PCR相比，F(xiàn)Q-PCR具有許多優(yōu)點：
1、 封閉反應，無需PCR后處理。
2、 特異性強，靈敏度高。
3、 采用對數(shù)期分析，摒棄終點數(shù)據(jù)，定量準確。
4、 定量范圍寬，可達到10個數(shù)量級。
5、 儀器在線式實時檢測，結果直觀，避免人為判斷。
6、 可實現(xiàn)一管雙檢或多檢。
7、 操作安全，縮短時間，提高效率。
    熒光定量PCR是一個方法，我們可根據(jù)臨床科室的不同要求開展檢測項目歡迎臨床醫(yī)生積極與我們聯(lián)系，以有利于疾病的診斷和科研課題的研究。目前已開展的檢測項目有：乙肝病毒DNA定量檢測（靜脈血2毫升、乳汁2毫升）
巨細胞病毒DNA定量檢測（靜脈血2毫升）
肺炎支原體DNA定量檢測（靜脈血2毫升）
生殖道淋球菌DNA定量檢測（分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水）
生殖道沙眼衣原體DNA定量檢測（分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水）
生殖道解脲支原體DNA定量檢測（分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水）
人乳頭瘤病毒DNA定量檢測（ HPV-6，-11，-16，-18）（分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水）
        2005.04.01